HBx蛋白与细胞膜钙离子通道蛋白Orail的关系
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【摘 要】目的: 研究乙型肝炎病毒x基因(hepatitis B virus x gene, HBx)蛋白调节细胞内钙离子可能分子机制, 揭示乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)诱导肝癌的可能途径. 方法: 培养HEK293细胞, 取第2代HEK293细胞转染pcDNA-HBx质粒, 培养12、24和48 h后, 细胞活力细胞毒性检测(cell counting kit-8, CCK-8)观察转染后细胞生长情况, Western blot检测HBx蛋白的表达情况, 当共同转染HBx基因、Orai1基因或STIM1基因后co-IP实验、免疫荧光检测观察细胞内蛋白结合情况. 结果: 转染pcDNA-HBx质粒后HBx蛋白可以在HEK293细胞高表达, 转染后的24 h后细胞增殖加快(P〈0.05), co-IP实验及免疫荧光检测结果均显示, HBx蛋白在细胞内可以与Orai1蛋白结合. 结论: HBx蛋白通过与细胞膜钙离子通道Orai1结合, 来升高细胞内钙离子浓度, 从而影响细胞增殖等活性.
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