CRF通过CRF2受体介导肠上皮细胞中TLR4的表达
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【摘 要】目的:研究促肾上腺皮质释放因子(CRF)介导肠上皮细胞中Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)的表达,并探讨其可能通过的受体途径.方法:常规培养人结肠上皮细胞株HT-29细胞,将HT-29细胞分为正常对照组(不加刺激剂),脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激组(LPS20g/L刺激24h),促肾上腺皮质释放因子(corticotrophin-releasing factor,CRF)刺激组(CRF20g/L刺激24h),CRF+LPS刺激组(预先CRF20g/L刺激12h,更换细胞液后再与LPS20g/L刺激12h),CRF+Antalarmin 组(CRF与Antalarmin20g/L共刺激24h),CRF+LPS+Antalarmin组(CRF与Antalarmin20g/L共刺激12h后再以LPS刺激12h),CRF+Astressin2B组(CRF与Astressin2B20g/L共刺激24h),CRF+LPS+Astressin2B组(CRF与Astressin2B20g/L共刺激12h后再以LPS刺激12h).刺激结束后,收取各组HT-29细胞,RT-PCR法和免疫印迹法检测各组上皮细胞中TLR4mRNA和蛋白的表达.ELISA法检测各组细胞上清液中IL-8的表达.结果:CRF可以诱导人结肠上皮细胞株HT-29细胞中TLR4表达导致IL-8分泌增多(P〈0.05),C R F1受体拮抗剂不能有效地阻滞C R F对TLR4的诱导(P〉0.05,CRF+LPS组vs CRF组),CRF2受体拮抗剂可阻滞CRF对TLR4的诱导(P〈0.05,CRF+LPS组vs CRF组).结论:CRF通过CRF2受体通路介导肠上皮细胞中TLR4的表达.
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